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分享GE葡聚糖凝膠填料層析原理

更新時(shí)間:2016-01-04瀏覽:3770次

   GE葡聚糖凝膠填料,可應(yīng)用于膽固醇、脂肪酸、激素、維他命、天然產(chǎn)物的分析。Sephadex LH-20的分離原理主要有兩方面:以凝膠過(guò)濾作用為主,兼具反相分配的作用(在反相溶劑中)。因?yàn)槟z過(guò)濾作用,所以大分子的化合物保留弱,先被洗脫下來(lái),小分子的化合物保留強(qiáng),后出柱。如果使用反相溶劑洗脫, Sephadex LH20對(duì)化合物還起反相分配的作用,所以極性大的化合物保留弱,先被洗脫下來(lái),極性小的化合物保留強(qiáng),后出柱。如果使用正相溶劑洗脫,這主要靠凝膠過(guò)濾作用來(lái)分離。

  GE葡聚糖凝膠填料的分離原理主要有兩方面:以凝膠過(guò)濾作用為主,兼具反相分配的作用(在反相溶劑中)。因?yàn)槟z過(guò)濾作用,所以大分子的化合物保留弱,先被洗脫下來(lái),小分子的化合物保留強(qiáng),后出柱。自GE的葡聚糖凝膠G25問(wèn)世以來(lái),到現(xiàn)在已經(jīng)有65年的歷史,G系列的填料也是古老和經(jīng)典的凝膠排阻系列填料,這種填料大的缺點(diǎn)就是不耐壓(尤其是G-100和G-200,流體靜力壓要求非常低)和分辨率差,G25填料一般用于透析和較低分子量多糖或蛋白分離,一般情況G25填料溶脹需要16-24h,溶脹好后的填料從色譜柱側(cè)面看有一種多糖*的乳光。
GE葡聚糖凝膠填料層析原理:
  凝膠過(guò)濾:依賴于分子的大小和形狀。
  吸附層析:依賴于被分離化合物與凝膠之間的氫鍵數(shù)量和質(zhì)量。
  分配層析:依賴于分離化合物在流動(dòng)相(溶劑)和固定相(凝膠)之間的分配,這主要由樣品的極性和溶劑的極性決定的。
 

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